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熒光分光光度計(jì)的使用需要注意哪些事項(xiàng)?

發(fā)布時(shí)間:

2021-01-26 00:00


  熒光分光光度計(jì)是一種利用光的掃描原理來檢測(cè)樣品的儀器,光遇到樣品會(huì)產(chǎn)生反射、折射等物理現(xiàn)象,再通過專業(yè)的強(qiáng)光數(shù)據(jù)分析,將樣品的外觀形狀以及內(nèi)部結(jié)構(gòu)構(gòu)造反映在專家研究的圖譜上,從而方便專業(yè)人士的研究。那么,此產(chǎn)品是由哪些部分組成的?使用又需要注意哪些事項(xiàng)?
 
  一、熒光分光光度計(jì)的組成:
  1.光源:本儀器常用的光源有高壓氙燈、激光器和閃光燈等,高壓氙燈作為激發(fā)光源時(shí),發(fā)出的連續(xù)光譜強(qiáng)度較大,是目前應(yīng)用較多的連續(xù)光源,一般高性能的熒光分光光度計(jì)會(huì)使用激光器作為光源,這種熒光儀可以對(duì)單分子進(jìn)行檢測(cè),但是價(jià)格比較昂貴,且在使用上也有一定的限制。
  2.單色器:儀器中的單色器是用來分離單色光的,且裝有激發(fā)單色器和發(fā)射單色器兩種單色器,激發(fā)單色器作用于光源和樣品室之間,用來篩選激發(fā)光譜,置于樣品室和檢測(cè)器之間的是發(fā)射單色器,可以篩選發(fā)射光譜。
  3.樣品室:樣品室一般由石英池架或固體樣品架組成,本儀器使用的樣品室和紫外可見分光光度計(jì)用的具有較大的差異,而且在測(cè)量不同類型的樣品時(shí)光源和樣品的測(cè)量角度不同。
  二、本產(chǎn)品的使用注意事項(xiàng):
  1.樣品應(yīng)盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池。
  2.在使用本儀器進(jìn)行熒光分析時(shí),為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù),一般需要開機(jī)預(yù)熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預(yù)熱時(shí)間可以縮短到10min左右。對(duì)某些易感光、易分解的熒光物質(zhì),盡量采用長(zhǎng)波長(zhǎng)、低人射光強(qiáng)度及短時(shí)間光照。
  3.溫度變化可引起本儀器熒光強(qiáng)度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子產(chǎn)率,熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異,大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大,測(cè)試溫度變化不超過±3℃,對(duì)測(cè)試結(jié)果幾乎無影響。
  4.當(dāng)本儀器的熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時(shí),溶液的pH對(duì)熒光強(qiáng)度有較大影響。因?yàn)槿跛峄蛉鯄A在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會(huì)發(fā)生改變,而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會(huì)因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。
  5.熒光分光光度計(jì)的熒光物質(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低,常見的熒光猝滅劑,如鹵素離子、重金屬離子、02、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象,因此,在較嚴(yán)格的熒光實(shí)驗(yàn)中必須除02。

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